生信星球培训第七十五期

学习小组Day-7笔记--小鲸鱼

2020-08-16  本文已影响0人  一小鲸儿

一.第一代测序

必备概念:
ddNTP 双脱氧的核苷酸,可以被DNA聚合酶识别结合到DNA链上,但由于没有本来要用来和下一个核苷酸形成磷酸二酯键的氧,所以在它后面DNA链终止,并且暗搓搓的人类给他上面带了荧光标记。
dNTP 正常的脱氧核苷酸(4种)
电泳 磷酸盐主链赋予DNA负电荷,DNA从负极开始迁移,较小的较轻长度的DNA进一步迁移到电泳板的底部(最后排出来四大组长度依次递增的闪荧光的东西)
(受本人知识水平所限,此处只做最土著的解答)
参考解说
整个过程类似于想要知道一排人都是谁(男,女,小男孩,小女孩的随机组合),然后给它复制出n列,加入美男,美女,乖男孩,乖女孩,因为又美又乖后面不好意思再站人了,并且这个又美又乖的我们还能看得见!神奇!(别问为啥一开始的看不见,可能不好看吧)然后大家排排坐,从长到短,我们就依次可以得出每个位次上的是谁,然后再根据互补原则知道之前的是谁。完美!

二.第二代测序

基本流程:

image.png
放几个参考链接
day7学习内容
测序技术原理及常用数据格式简介
二代测序的一大特点是边合成边测序,每次只添加一种ddNTP,拍照后洗去,加入激发荧光缓冲液,使其可继续连接后再添加新的ddNTP。
看了几个小时就明白了这么一点。。。。
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