冰冻切片

2022-10-26  本文已影响0人  小牛学生信

1. 准备试剂和耗材

包埋剂;镊子,包埋盒,干冰,液氮

2.操作步骤

2.1 速冻:干冰异戊烷体系/液氮

在异戊烷中加入干冰,形成冷的体系,我问了我们常用试剂商,他那里没有异戊烷,所以采用液氮速冻体系


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2.2 组织前处理

把剥离下来的新鲜组织,用吸水纸吸干水

此步骤一定要吸干水分,如有液体残留,OCT包埋后,组织表面形成冰晶,影响切片效果

空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南

2.3 组织包埋

可以在包埋盒上做上标记(比如组织来源,方向),平铺一层包埋剂,均匀覆盖在整个底部,按照一定方向把组织把组织放进包埋盒中,再继续加入包埋剂填满整个包埋盒。

一定不能有起泡,如果有起泡,可以用注射器针头挑破

2.4 速冻

把包埋盒放进液氮中速冻20-30s,取出后放到-80℃冰箱保存。

空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南

高冷冻切片的技术水平

液氮异戊烷冷冻OCT包埋法

(20221026)

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