科研汪的日常 48 伊文思蓝测血脑屏障通透性

2022-08-28 本文已影响0人 007木子

伊文思蓝是一种常用的偶氮染料制剂，由于其在血液中与血浆白蛋白有很高的亲和力，因此常被用于示踪观察血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)的完整性，或用于测定血容量。

科研汪最近用到的是用伊文思蓝测血脑屏障通透性。正常状态下血浆白蛋白无法透过血脑屏障，与血浆白蛋白结合的依文思蓝无法使神经系统着色，若血脑屏障被破坏，依文思蓝就可以使其着色。随后通过化学透析法或比色法，检测伊文思蓝在组织中含量的高低，进而判断血脑屏障的完整性。

实验准备及主要步骤：

[if !supportLists]1. [endif]各组动物腹腔注射0.2ml（2% EB溶液）

[if !supportLists]2. [endif]1％戊巴比妥钠30-40 mg / kg 麻醉后打开胸腔，心内灌注PBS溶液20-30ml（当右心房流出液体变清澈时即可），断头后取脑组织切片(1-2mm)，并观察EB染色情况。

[if !supportLists]3. [endif]脑组织称重，每100mg组织加入，500ul PBS进行研磨，随后加入等体积甲酰胺，55℃孵育24h。

[if !supportLists]4. [endif]1000 r/ min 离心5min取上清液，用分光光度计检测波长为620 nm 的吸光度。

参考链接：

1.伊文思蓝：

2.血-脑屏障：