单细胞转录组简介
2023-09-09 本文已影响0人
expgene
探序基因肿瘤研究院
实验大致操作步骤:
对组织进行细胞解离,看细胞解离后是否完整;细胞合格后进行上平台,行成单个细胞的油包水等操作,构建测序文库;上机测序,数据量大概是100G;生物信息分析
知名平台:10x genomics
使用10x genomics测序,一个标本大概1.6万到2万多,具体根据所选择试剂盒和是否包含TCR BCR,CITESEQ等来决定
细胞解离步骤比较关键,有些样本好处理,有些不好处理。对于不同类型标本,要不断摸索细胞解离程序,以提高成功率。像肿瘤穿刺标本,不太好处理,最终很多会因细胞质量不好,或细胞数量不足,导致无法上机。比如胰腺癌穿刺标本,很容易失败。