细胞培养中胎牛血清的重要作用

许多临床和做科研的小伙伴们都要涉及到细胞培养，在细胞培养实验中，血清无疑成为影响实验成功与否的重要因素，而在众多血清之中，牛血清是最为常用的。牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，其中含有丰富的细胞生长所必须的营养成分，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。牛血清是一种成分复杂的混合物，而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。牛血清主要成分有蛋白质，多肽类，激素类，其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

今天小海星将为大家分享下胎牛血清的作用、选择及保存、冻融方法。

胎牛血清特点

采集方法：通过密闭系统收集法保证血清质量，保证低内毒素、低血红蛋白过滤方法：通常采用3个连续的100nm孔径的过滤器过滤检测体系：每批产品均经过严格的细菌、支原体、病毒、内毒素、血红蛋白等检测

胎牛血清功能及作用

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必需的营养成分，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

1. 提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4. 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5. 起酸碱度缓冲液作用。

6. 提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

血清，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。

其主要作用：

1. 血清提供：营养和能量来源；生长和粘附因子；肽和类固醇激素；载体蛋白。

2. 保护细胞：免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。

胎牛血清与新生牛血清、小牛血清区别

1. 血清类别

2.采血方式不同

胎牛血清：母牛怀孕3-8个月时，采用剖腹心脏密闭穿刺取血

新生牛血清、小牛血清、供体牛血清：分别是取自新生牛（小牛）、成牛的血

3.血清成分不同

胎牛血清还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少；促细胞生长因子、促帖附因子、激素及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清

4.用途不同

某些细胞的培养必须使用胎牛血清才行，如：干细胞、淋巴细胞、神经细胞、星状胶质细胞等；而有些细胞需要小牛血清就可以，如：肿瘤细胞等。使用浓度也不同，一般在10%-15%，有特殊要求的浓度在20%

5.颜色不同

血清根据血红蛋白含量的不同，表现的颜色也不一样

真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂，一般表现出微红色或橘红色；而新生牛（小牛）血清则表现为蜡黄色或偏黄色

6.澄清度和粘稠度不同

胎牛血清蛋白和脂类含量低，表现为稀薄、清淡

新生牛（小牛）血清相比更加粘稠

7.血清选择

在这几类血清中，胎牛血清的品质无疑是最高的，如果你的细胞比较娇贵难养，出现比较好的培养效果请选择胎牛血清；如果你的细胞比较易养，给点什么血清都能出现很好的效果，使用新生牛（小牛）血清就足够了。

一般选择血清种类可以根据ATCC及实验需要来选择

血清保存方法

1.如何保存血清？

血清应该在-20℃保存。如果一次无法用完一瓶，应该无菌分装后冷冻保存。注意避免反复冻融。

2.为什么储存在冰箱中的血清会出现沉淀？

有些胎牛血清产品没有预老化，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在－20℃储存胎牛血清，避免反复冻融。

冻融方法

正确解冻方法：

将血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小时，使之缓慢部分溶解，然后再放在室温下使之全溶。注意：溶解过程中要每隔一段时间缓慢地摇动血清使之混匀。切记：避免37℃水浴。

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