实验复盘㈡------连接&转化
2020-06-09 本文已影响0人
Han_zh
利用ClonExpress®II One Step Cloning Kit 非连接酶依赖型单片段快速克隆试剂盒
ClonExpress®技术是一种高效的 DNA 无缝克隆技术,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。
Prepare:
提前打开制冰机
连接PCR反应程序是37℃,30min(切记盖温是37℃)
LB液体和LB固体培养基
Kan抗生素(100ml LB培养基+100μLKan)
大肠杆菌感受态细胞(克隆感受态细胞)--Trans1-T1 Phage Resistant Chemically Competent Cell
37℃、200rpm摇床
1. DNA重组反应(ClonExpress II One Step Cloning Kit)
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于冰上配制反应体系
连接体系.png -
使用移液器轻轻吸打混匀,短暂离心将反应液收集至管底
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PCR37℃反应30min
2. 重组产物转化
诺唯赞连接试剂.png 转化步骤.png无缝克隆.png
微信截图_20200908222038.png Step2.png