载体Vectors
2020-03-19 本文已影响0人
Han_zh
一、载体被誉为基因操作中的“分子的运输车”，其本质是一类核酸分子
携带外源目的基因进入宿主细胞，并能稳定存在，利用宿主细胞的复制或表达系统，进行复制和表达系统的工具称为载体。
图片来自MOOC.Png
二、作为分子的运输者—载体需要具备以下几个基本条件：
- 具有自我复制的能力—载体必须要有自己的复制起始位点，能够独立复制
- 具有合适的限制性核酸内切酶的单一酶切位点—外源DNA片段准确的插入到载体上
- 具有合适的选择标记基因—用来筛选重组体
选择性标记基因的作用：首先证明载体已经进入至宿主细胞；此外还可将含有外源基因的宿主细胞从其他细胞中筛选出来
最常用的遗传选择性标记基因:
✔ 抗药性基因如抗氨苄青霉素、抗卡那霉素kana等抗抗生素基因
✔ lacZ基因
✔ 绿色荧光蛋白基因GFP
✔ 发光基因
三、依据用途和功能可分为：
克隆载体和表达载体
A.克隆载体(克隆基因或DNA片段）：
克隆载体携带外源基因进入宿主细胞，使外源基因在宿主细胞中繁殖的载体。
复制子是克隆载体最重要的一个结构成分，复制子的存在带动外源基因在宿主细胞中复制扩增。
图片来自MOOC.Png
B.表达载体（用于基因的蛋白表达）：
表达载体是能使外源基因在宿主细胞内转录和翻译的载体。
与克隆载体想比较，表达载体不仅可以使外源基因在宿主细胞中扩增，而且还可利用表达系统完成在宿主细胞中的表达。
二者在结构上的差异
