病毒包装,目标细胞感染

2020-11-11  本文已影响0人  找兔子的小萝卜

第一步

3ug 2G
3ug X2
6ug 目标质粒
opti-medium 150ul
混合为A,静置5min

40ul PEI+110ul opti-medium 混合为B,静置5min

第二步

A与B mix 静置30min
此时给100mm的皿换3ml的opti-medium

第三步

4h后换全培养基
第二天早晨换液
换液后48小时收病毒(0.45的筛子)

第四步

此时准备A549细胞
60mm
3ul(1:1000) polyberen
1ml 全培养基
2ml 的病毒(在细胞传代同时进行感染)
培养过夜换液
8小时候换液
第二天早晨继续上述病毒感染(感染重复3次)

第五步

使用诱导剂,诱导3,5,7
收样 测Wb,PCR

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