实验复盘㈦----农杆菌介导转化P.expansum

prepare：
LB液体培养基
IM（Induction Medium）液体 & 固体培养基
CYA（Czapek yeast extract agar medium）固体培养基
MES，乙酰丁香酮（acetosyringone，AS）
Rif，Kana，潮霉素B，羧苄青霉素钠
28℃、220rpm摇床，离心机，96孔板，50mL灭菌锥形瓶，10/1.5mLtube
P.expansum 孢子悬浮液，灭菌玻璃纸

一、农杆菌介导转化P.e的方法

• 农杆菌准备与预培养
• 青霉孢子准备与预培养
• 青霉与农杆菌共培养44h

LB液体培养基+ Rif + Kana后挑取单菌落-Yellow.jpg 10h时的菌液-紫色.jpg
24h时菌液-Yellow.jpg
P.e预培养4h.jpg

二、影响转化效率的因素：
⒈共培养材料：以不萌发的新鲜孢子为转化材料
⒉共培养时间：100 μL∶100 μL 的比例混合，锡箔纸包住44h
⒊共培养温度：22℃
⒋诱导剂As浓度：200μM
⒌农杆菌共培养时的OD₆₀₀值
⒍培养基的pH

图片来自文献.png