慢病毒的背景知识
2021-07-30 本文已影响0人
不学无数YD
- 用于生产慢病毒质粒的菌株：
由于慢病毒存在较长的末端重复序列，为了减少不稳定区域的同源重组频率，一般使用：NEB稳定细胞、invitrogen Stbi3.以维持重复序列和DNA产量。（如果质粒含有ccdb基因的网关盒，则需要ccdb存活菌株） - 生产病毒的细胞系：
293T细胞系 - 宿主决定因素：
膜蛋白与宿主表面受体相互作用的能力，VSV-G包膜蛋白常用于慢病毒生产。
-整合区域
通常整合到转录活跃的基因中，偏好与目标物种无关。病毒整合酶在整合位点偏好中起作用，LEDGF/p75,即慢病毒拴系蛋白，将预整合复合物招募到转录单位并促进整合。 - 驱动cDNA表达的启动子（即RNA pol II启动子）
如CMV、RSV - 驱动shRNA的启动子（即驱动RNA pol III启动子）
如U6、H1
