HiBio-ID™生化鉴定卡的使用方法

HiBio生化鉴定（卡）试剂盒，是由国际著名微生物产品生产商HiMedia公司生产，ISO, WHO-GMP认证，CE和FDA注册，用于菌种生理生化鉴定，品质可靠，准确度高。

试剂盒含生化鉴定卡、辅助试剂、结果诠释表和标准菌种表。每个试剂盒含12种或24种生化试验，只需对单菌落纯培养物35℃±2℃培养18-24小时即可出结果。优于生化鉴定管，操作简单，省时省力。

HiBio-ID™系列试剂盒有20多种，包括肠杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌、芽孢杆菌、不动杆菌、链球菌、非发酵菌、乳酸菌等的鉴定，可鉴定菌种总数超过400多种，可初筛后选择使用，操作方法如下：

1、准备接种液

①待测菌株需要先分离纯化。只有纯化的菌株才能用于检测。可用普通培养基如营养琼脂（#M001）或适合的鉴别培养基分离菌株。（具体培养基以说明书为准）

②挑取单个菌落，接种到5ml脑心浸出液肉汤，在35-37℃培养4-6小时，直到菌液浊度达到产品说明书上的要求。一些苛养菌可能需要孵育6小时以上。在这种情况下，孵育应使接种液浊度达到指定OD值或McFarland浊度标准。

③遵循产品说明书的要求操作。

注意：如果接种液浊度＜0.1OD或0.5 McFarland标准，可能会得到错误的假阴性结果。

2、接种

①无菌打开试剂盒，撕去密封箔。

②采用表面接种方法，在鉴定卡上每孔加50μl上述接种液。每孔用接种环涂抹接种。

3、孵育

HiBio-ID™生化鉴定卡中，货号为KB001--KB014的产品，均在35℃±2℃培养18-24小时，只有KB006例外，需在室温（22-25℃）孵育48-72小时。

4、试剂

必要时需要添加其他显色试剂，培养结束后，个别微孔需要加入1-2滴显色剂，等待几秒钟或几分钟。颜色发生变化。

5、读取结果

人工读取结果：显色结果与《结果诠释表》比对，确定是否存在阳性反应。再根据《菌种标准表》完成鉴定/或用HiBio-ID™ Readers生化鉴定仪鉴定。

实验须知：

1.试验前，将试剂盒从冰箱取出，放置在室温。

2.某些菌的糖发酵可能不显著，这时可记录为±，孵育延长至48小时。之后显示为橘黄色则为阴性。

3.对于赖氨酸和鸟氨酸脱羧试验，孵育可能需要延长至48小时。

4.如果菌种出现矛盾的结果，可能因为菌种突变或用于分离培养的培养基的缘故。