2018-10-16 细胞活性的检测方法比较

细胞活性的定义具有多样性，通过对关键的细胞生理指标进行标记来进行检测，如细胞代谢的活性（酯酶的功能，MTT法）、凋亡标记物（Annexin V）、细胞氧化还原电位、膜电位、增值率（DNA含量）、线粒体功能和膜的完整性等。
目前被广泛使用的标准是基于对细胞膜的完整性和相关的染料排斥发检测。常用染料有台盼蓝、碘化丙啶，需要设备有血球计数板、荧光显微镜、流式细胞仪、成像技术仪

台盼蓝拒染法

• 收集细胞后用PBS清洗细胞，血清中蛋白也能被台盼蓝结合，在流式细胞仪660nm处可以被检测到。
• 染色3-5min内应完成计数，时间越长，细胞死的越多
  900ul 细胞悬液+100ul 0.4%台盼蓝染料，轻轻吹打混匀，室温染色3min，取10ul用血球计数板/细胞计数仪计数。
  正常传代的细胞活性应该在95%以上。
  缺点： 手工计数过程费时费力，系统误差较大。

碘化丙啶（Propidium Iodidi，PI）染色

细胞样本用5μg/ml的PI染色（Life Technologies），孵育5min，所有染色后的样本在20min内完成检测，所有分析操作均在Moxi Flow仪器上进行。