Vero细胞无血清培养的应用

Vero细胞是现阶段病毒疫苗生产的主要的细胞基质。Vero细胞无血清培养技术的应用集中体现在病毒疫苗的开发研究和商业化生产中。Vero细胞无血清培养技术提高了病毒疫苗生产工艺的可靠性、产品质量的可控性和安全性。目前，Vero细胞无血清培养已在包括狂犬病疫苗、流行性乙型脑炎疫苗、脊髓灰质炎疫苗、流感疫苗、肾综合征出血热疫苗、甲型肝炎疫苗、呼肠病毒疫苗等的研发和生产中得到应用。

狂犬病疫苗

狂犬病疫苗是众多Vero细胞生产的疫苗中商业化最为成功的病毒疫苗。应用Vero细胞无血清培养技术生产的狂犬疫苗在免疫原性和安全性上均已得到充分的肯定。与含血清的合成培养基相比，商业化的Vero细胞无血清培养基更能满足病毒生产阶段细胞的营养需求。

流感疫苗

流感疫苗长期以来一直使用鸡胚生产，自Vero细胞被引人流感疫苗生产后，经实验证实几乎所有在鸡胚中测试的病毒株都能在Vero细胞中生长并达到高滴度。采用Vero细胞无血清培养技术生产流感疫苗不仅能提高疫苗的产量和质量，其重要性更在于能缩短疫苗生产周期、提高疫苗生产的计划性，从而更有效地应对流感的暴发。

脊髓灰质炎疫苗

国外很早就有1 000 L生物反应器规模灌注培养Vero细胞生产脊髓灰质炎疫苗的实例。目前，Vero细胞无血清培养生产脊髓灰质炎疫苗仍处于研发阶段。Cinatl等的研究结果表明，静置培养下无血清培养基和含血清培养基中的Vero细胞生长和病毒生产无明显差别，甚至无血清培养基中病毒的比生产率更高一些。

肠道病毒71疫苗

2008年伊始在我国安徽、北京等地暴发的手足口病是一种由肠道病毒71(EV71)感染引发的严重的儿童神经系统疾病。由于目前尚无针对该病毒的有效抗病毒剂，开发有效的疫苗成为控制由EV71感染引发的手足口病的有效措施。

病毒性疫苗生产所使用的细胞培养基大多为M199、MEM或DMEM合成培养基，添加一定比例的灭能新生牛血清来进行。生产的过程是按 GMP的要求进行检查评定的，细胞培养基更换批号或更换厂家，血清批次间的差异经常出现影响细胞生长的情况。

缔一生物为您推荐一款可用于Vero细胞培养的无血清培养基，由HiMedia公司生产的SFRE 199-1和SFRE 199-2，是在动物细胞培养基M199的基础上研发出来的。

其主要区别是SFRE-199-1和SFRE-199-2将M199标准配方中的精氨酸增加到150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，组氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以获得较大的细胞生长而未表现出毒性。与加胎牛血清的常规培养基比较，细胞生长速率、产量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天单层细胞达到充分融合。