数据可视化的单细胞分析思路
2020-10-19 本文已影响0人
jiarf
10X数据
UMI:一个细胞上的不同的转录本
barcode:区分细胞与细胞之间
1.测序数据平台
1.1、BD Rhapsody
单次实验可制备100-10000个单细胞文库
单细胞效率最高,约80%
靶向测序,200-500个基因
可以实现转录组-蛋白组联合分析
1.2 、10X genomics
500-10000个细胞
转录组和免疫组联合测序(TCR,BCR)
单细胞ATAC-seq
2.数据可视化的单细胞分析思路

若中位基因数在300-400左右,代表不好

2万行,60000列(矩阵)
单细胞的测序的原始矩阵行为基因,列为细胞(barcode),可是普通转录组的行是基因,列是样本


不同实验室批间大


seurat都是好的,但是要改参数
聚类

分群(亚群)

个体特异性亚群不太常见

singleR做细胞类型注释

注释的可视化

注意到c0,c11,c12注释的都不纯(就是说,在两个或多个注释类中,它都占的个数较多)怎么办呢?
单独把他们拿出来做一个二次的细分
单细胞很常见的基因会大量表达在一些想不到的细胞亚群中


做的经常是一对多