如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等（非小鼠）动物的体内基因敲除/表达

如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢？

如果实验室研究人体疾病基因，需要稳定表达时，我们可能会选择基因工程小鼠，但如果课题组研究的是其他哺乳动物，比如猪、蝗虫、鱼之类的，基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体，然后打入靶细胞进行同源重组，再培养细胞、筛选……一套工夫下来，要不目的基因没重组，要不模型全死了。要不找公司做？老牌的公司构建基因工程小鼠都得六个月，两个月构建载体，两个月打靶筛选，两个培养。如果出现杂合子就得加期，关键价格还贵。现在大部分公司都是批量化的生成基因工程小鼠模型，对于大型哺乳动物的基因敲除/表达模型还处于探索阶段，也就以为着做这些模型比小鼠更贵，花的时间更长。经费有限，时间有限，的确是不敢轻易尝试。但只做细胞，不做动物实验，难发文章啊……

如果有办法能时间短又花费少的做这些动物的基因敲除/表达就好了。

实际上，的确有这种方法。

发表在《Development》上的一篇题为“The microRNAs let-7 and miR-278 regulateinsect metamorphosis and oogenesis by targeting the juvenile hormoneearly-response gene Krüppel-homolog1”的文章中表述：将agomiR与体内RNA转染试剂（Engreen）混合处理后，在蜕皮24小时内的4龄若虫和成虫出现后12小时内的成年雌性分别腹腔注射0.5nmol和1 nmol agomiR，qPCR实验表明实验组miR-278和let-7的表达水平显著上升。

发表在《COMMUNICATIONS BIOLOGY》期刊上题目为“MicroRNA expression profile in Lampetra morii upon Vibrio anguillarum infection and miR-4561characterization targeting lip”的论文写道：根据制造商的说明，使用含有 10% 葡萄糖的Entranster（Engreen，北京，CHN）试剂将 miR-4561 模拟物、抑制剂和 NC 转染到七鳃鳗的神经上体组织中，并通过miR-4561的 qRTPCR评估转染效率，注射mimic组的miR-4561表达较对照组显著上升，注射inhibitor组的表达较对照组显著下降.

发表在《Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics》期刊上题目为“Coronary Microembolization Induces CardiomyocyteApoptosis in Swine by Activating the LOX-1-Dependent MitochondrialPathway and Caspase-8-Dependent Pathway”文章中描述： 将总质量为 300 mg 的 LOX-1siRNA 或对照siRNA用 600 mL 转染试剂（Entranster-in vivo；Engreen）通过上下吹打溶液充分混合。然后通过1.8F输液导管将混合物注入猪的LAD动脉，然后通过1.8F输液导管将混合物注入猪的LAD动脉，然后注射2mL生理盐水。实验组的LOX-1蛋白表达显著下降。

综上，体内转染试剂帮我们排除课题对象的障碍，实现体内基因的有效敲除/表达，助力动物研究迈入更深层次的领域。