琼脂糖凝胶电泳Agarose gel electrophores
2020-03-26 本文已影响0人
Han_zh
一、凝胶电泳
将DNA分子放置到以凝胶为介质的电场中时，它会以一定的速率移向适当的电极。
根据片段大小对DNA分子进行分离和观察最简便的方法。
二、凝胶电泳的基本原理
- 凝胶：带孔的筛网状多聚物，惰性好，很稳定，可以作为支持介质承载DNA。
-DNA分子糖-磷酸骨架中的磷酸基团呈离子化状态。 - DNA多核苷酸链：多聚阴离子，带负电。
- DNA分子从点样孔开始，穿过凝胶的孔隙，沿着凝胶向正极方向泳动。
-
形状或构型不同的分子迁移率不同，而被分离。
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三、琼脂糖凝胶（agarose gel）
线性的琼脂糖多聚物可以组成柔韧的纤维，交织形成有孔隙的网状结构的凝胶。
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四、琼脂糖凝胶电泳的过程
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[图片上传中...(IMAGE.jpg-1ad4a8-1585232696200-0)]
A. 制胶：1%胶浓度、50×TAE缓冲液、GoldviewⅡ型
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B. 制胶板：胶板大小、样品孔大小、胶厚度、梳子大小
C.上样：记录上样顺序和上样量
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D. 电泳：恒压100V、25min
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E. 检测：凝胶成像系统
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