BIOG组织DNA磁珠法提取试剂
BIOG Tissue DNA Mag-B Kit是我公司研发团队专为从各种组织样本中提取基因组DNA而设计。提取的样本范围包括各种动物组织、啮齿类动物尾巴、临床与法医样本、毛囊等。本试剂盒采用特制的复合消化液消化组织中的蛋白质,使基因组DNA更容易释放出来,因而本试剂盒DNA提取产率较高。试剂盒采用了我们自己研发的改性硅基磁珠,核酸吸附能力强,提取DNA纯度高。试剂盒操作简便快速,特别适用于一次试验较多样本的批量提取。与同类产品相比,提取得到的DNA纯度更高,产量更大,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
特点
◎操作简便快速,可在30分钟内获得理想的DNA,适用于一次处理较多样本的批量提取;
◎提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9;
◎采用自主研发的改性硅基磁珠,同样的样本量提取的DNA更多。
操作步骤
1.请自行准备:无水乙醇、异丙醇、1.5mL离心管,生理盐水。
2.取出洗涤液,按70%比例加入无水乙醇,如6mL加入14 mL无水乙醇,12mL加入28 mL无水乙醇,混匀。
3.取10-20mg左右的组织,用液氮研磨为粉末,转入1.5mL 离心管内,加入100 μL 生理盐水,振荡15秒 (或直接在100 μL 生理盐水中将组织匀浆为细胞悬液),加入200 μL 裂解液, 20 μL 复合消化液,充分混匀,56℃温育12分钟(如组织匀浆不充分,可适当延长消化时间至组织完全消化)。
4.冷却到室温,加入300μL异丙醇,充分混匀,再加入20μL磁珠复合液(每次使用前须充分混匀),振荡混匀3min(注意不要颠倒混匀,以防磁珠粘附于管盖内壁),静置2min。
5.将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。
6.加入800μL配制后的洗涤液,将离心管从磁力架上取下,充分振荡2min,确保磁珠完全分散。将离心管置于磁力架上放置约20s至磁珠完全吸附,开盖,彻底吸弃上清液(注意枪头不要接触磁珠)。
7.将离心管从磁力架上取下,开盖,干燥约3-5min,至无明显乙醇气味。
8.加入50-100 μL洗脱液,振荡至磁珠充分散开,室温静置2min,再振荡混匀1min。
9.将离心管置于磁力架上,待磁珠完全吸附后,小心吸取上清液至一新的1.5mL离心管中,提取的核酸可直接用于下游实验,或-20℃保存备用。