单细胞转录组

scRNA-seq: Microwell-seq

2023-04-05  本文已影响0人  LET149

From Guo-Guoji Lab in Zhejiang University.

References :

1. Microarray fabrication

整体流程:硅晶片 > PDMS > 琼脂糖

image.png
1.1 硅晶片
  • 硅晶片大小:20mm x 20mm

  • 微孔大小:直径为 28um;深度为 35um

  • 每张硅晶片上的微孔数量:100,000

  • 合成公司:苏州研材微纳科技公司http://www.rdmicro.com/#/home

1.2 过程说明
image.png

2. Bead synthesis

整体流程:


image.png
2.1 磁力球的尺寸

直径:20~25um

2.2 合成步骤
  • 第一步:带有羧基的磁球带有氨基的单链DNA 相连;一共96个孔(96孔板),每个孔中的 Barcode1 相同,孔与孔之间的 Barcode1 不同;把96个孔中的液体混合后再分配到一个新的96孔板的96个空中,用作第二步

  • 第二步:加上 Barcode2;一共96个孔(96孔板),每个孔中的 Barcode2 相同,孔与孔之间的 Barcode2 不同;把96个孔中的液体混合后再分配到一个新的96孔板的96个空中,用作第三步

  • 第三步:加上 Barcode2UMI;每个孔中的 Barcode3 相同,孔与孔之间的 Barcode3 不同,每个 Barcode3 对应的 UMI不同

  • 结果: 同一个磁力球上的 Barcode1, Barcode2Barcode3 相同,但是 UMI 各不相同;不同的磁力球上由 Barcode1, Barcode2Barcode3 形成的组合不同

  • 合成公司:苏州知益微球科技有限公司http://www.kbspheres.com/en/wap/index.asp

2.3 过程说明
image.png

3. Sequence data process

4. Protocol和操作视频

https://bis.zju.edu.cn/MCA/index.html

上一篇 下一篇

猜你喜欢

热点阅读