生物信息学与算法ATACSeq 开放染色质分析生信必备生物知识

ATAC-seq ——转录调控研究神器

2019-03-07  本文已影响47人  黄晶_id

问:“ 我用ATAC-seq能干啥?”

ATAC-seq能回答以下三个问题:
1.找调控某一生物学过程的关键转录因子
2.找哪个转录因子调控了我感兴趣的基因
3.找我感兴趣的转录因子调控的靶基因

1.找关键调控因子

问:适用于啥样的问题?
答:两种或几种状态的sample,想知道是哪些转录因子引起的状态差异。

用ATAC-seq标出早期胚胎发育各时期的开放染色质区域,找出差异,查看差异开放染色质区域富集了哪些转录因子的motif,这些转录因子就是调控2细胞期→4细胞期→8细胞期→囊胚期这一发育过程的关键转录因子

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通过这种方式,找到了这几个关键的调控因子,对其中的Nr5a2进行深入研究。

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对比Knockdown前后的RNA-seq数据,确认NR5A2是早期胚胎发育中重要的调控因子。

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2.谁调控了我感兴趣基因?

这个问题,给出三个解决方案。

看一下Plan C:ATAC-seq + motif分析的模式图

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单做motif分析也能做这事儿啊!

为啥还要做ATAC-seq呢?

motif分析只能标出某基因上游启动子区域有哪些TF的motif,这些TF不一定真的能跑来结合。用ATAC-seq标出这里有蛋白结合,但不知道具体是哪个转录因子。

ATAC-seq + 某个基因上游的motif分析,准确找到基因上游结合的转录因子。

3.转录因子的靶基因是谁

优先推荐用ChIP-seq找转录因子的靶基因,即Plan A。

再结合TF KD/KO/过表达或激活sample的RNA-seq,能够更准确找到转录因子靶基因

如果没有ChIP级别的抗体,无法做ChIP-seq,就退而求其次,用ATAC-seq找转录因子的靶基因。用ATAC-seq标出基因组范围哪里有调控蛋白结合,再标出哪里有某个TF的motif,二者相叠加,就能推测出这个TF调控的靶基因。

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