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冷静应对

蛋白质相关基础知识

  抗原和抗体均属于蛋白质；蛋白质之间存在相互作用，抗原和抗体的结合本质上属

于蛋白质的相互作用；所有的蛋白都具有空间结构；任何蛋白质均是一种抗原，抗原和抗体是相对的概念。

抗原、抗体的概念？

  抗原（antigen，Ag）是指能与T细胞、B细胞抗原受体或抗体特异性结合，具有启动免疫应答潜能的物质。抗原分子表面具有特殊立体构型和免疫活性的化学基团或区域称为抗原决定簇，又称抗原表位（Epitope）。机体的免疫应答针对的是抗原表位，它们也是与抗体相结合的部位。抗原通常可带有多个抗原决定簇，而且一般是多种决定簇，每一种决定簇决定一种抗原特异性。 一个抗原分子上能与相应抗体发生特异性结合的决定簇总数为抗原结合价。

  抗体，抗体（Ig）是由抗原刺激机体免疫系统后产生，并能与相应抗原发生特异性结合的物质。抗体具有空间结构，也具有抗原决定簇，也可被其他蛋白（如与二抗）的结合。根据Ig分子的理化特性及其抗原性，分为IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。所有Ig分子都有相似的基本结构，称为单体。分泌型IgA由2个单体组成；IgM由5个单体组成。

指点江山

基于版白纸检测的方法？

  酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金技术、蛋白电泳SDS-PAGE、免疫印迹试验（Western blot）间接免疫荧光（IFA）、过氧化物酶单层细胞试验(IPMA

ELISA原理及分类？

  ELISA（酶联免疫吸附实验）是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种检测技术 。广泛应用在测定液体样本中的病原、抗体、激素等有机物质。

原理--将抗原抗体反应的特异性，与酶反应的敏感性相结合的一种方法。它以酶作为标记物，与抗体联结，形成酶标抗体，其与相应的抗原作用后，通过底物的颜色反应进行抗原的定性和定量（酶标测定仪）分析。常应用与病原抗体检测、毒素检测、激素检测和细胞因子检测。

分类——间接ELISA、夹心ELISA和竞争ELISA。

再学养猪

胶体金的原理、优缺点？

优点：a、操作非常简单，不需要额外仪器；b、反应迅速，一般在5min内出结果；c、适合对激素类物质进行快速定性。

缺点：a、大多只能定性，仅可判断阴阳性；b、可用于检测抗体，但无法数据化；c、缺少畜禽行业标准，质量参差不齐；d、仅适用体液检测，病原检测敏感性差。

病原检测的操作流程？

  样本前处理--核酸提取--PCR扩增试剂配液--加样--扩增/上机

样本前处理？

  脐带血，血浆，血清——取200ul用于核酸提取；

鼻拭子，肛拭子——把拭子放入5mL EP中，加入500-1000ul生理盐水，浸泡15-30min，取200ul用于核酸提取；

唾液、精液——取200ul用于核酸提取；

粪便——挑取黄豆粒大小粪便（~5g），放入5mL EP管中，加入1ml生理盐水，浸泡15-30min，取200ul用于核酸提取；

 

含蓄的未来

什么是菌落？

  定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。

10、细菌分离--是指从临床发病动物组织脏器、粪便或者混杂微生物中获得单一菌株的培养

方法。通过分离，使细菌在平板中分散生长，便于观察单个菌落特性，也易

挑取单个菌落，进行生化鉴定，确定细菌种类。

药敏试验及原理？

  药物敏感试验，简称药敏试验（或耐药试验），旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感（或耐受）程度，以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。一种抗生素如果以很小的剂量便可杀灭细菌或抑制其生长，则称该种致病菌对该抗生素“敏感”。反之，则称为“不敏感”或“耐药”。

  其原理是药敏纸片中含有的抑菌药物能够抑制平皿表面细菌的生长，抑菌药物随琼脂扩散而逐渐降低浓度，形成的抑菌环的直径与抑菌效果正相关。药敏试验选择的抗生素不一定是有效抗生素，但可排除那些是无效抗生素。

中和试验及应用？

  中和试验是以测定病毒的感染力为基础，以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力为依据，来判定免疫血清中和病毒的能力。常应用于测定血清抗体效价、确定疫苗首免日龄和评价猪群免疫状态。

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