做NIH3T3细胞的siRNA转染,沉默效率在50%左右,请问如
2023-12-06 本文已影响0人
实验小助手
答:不知道您的具体用量,但一般可以从几个方面来提供沉默效率:
(1)优化siRNA和转染试剂的用量。具体优化方法可以在Entranster-R4000的说明书上看到。经过优化后,据我们和客户的经验,对NIH3T3,沉默效率应该可以达到80%以上。
(2)在沉默的峰值点观察结果,如在mRNA水平,可在24-48小时观察,在蛋白水平,可在更长时间如48-72小时观察。具体时间根据具体基因的表达情况确定。
(3)优化转染时的细胞数量。转染时较少的细胞数量,可延长观察时间,同时避免由于细胞密集造成的抑制。