DIAMOND: 超快的蛋白序列比对软件

2019-08-28 本文已影响0人 xuzhougeng

相见恨晚，还好遇到了它

今天用BLASTX将我的转录本序列在UniProt蛋白数据库(700w条序列)中搜索，80个线程，过了1小时大概就分析1000条吧。实在是有点慢，于是我想到之前耳闻的DIAMOND，据说速度非常快，于是我测试了下。没想到，这工具居然那么快。

根据DIAMOND介绍，它有以下特点

比BLAST快500到20,000倍
长序列的移框联配分析(frameshift alignment)
资源消耗小，普通台式机和笔记本都能运行
输出格式多样

我就看中它一点，速度快。

软件安装异常的简单，因为提供了预编译的64位可执行文件

wget http://github.com/bbuchfink/diamond/releases/download/v0.9.25/diamond-linux64.tar.gz
tar xzf diamond-linux64.tar.gz
# 有root全新啊
sudo mv diamond /usr/local/bin
# 无root权限, ~/bin是自己当前目录下
mv diamond ~/bin

因为 diamon的功能就是将蛋白或者翻译后的核苷酸和蛋白数据库进行比对，没有BLAST那么多功能，所以软件使用也是异常的简单。

第一步: 先从NCBI上下载蛋白数据库。 NR库是NCBI的非冗余蛋白数据库，

wget ftp://ftp.ncbi.nlm.nih.gov/blast/db/FASTA/nr.gz
gunzip nr.gz

也可以从ftp://ftp.ncbi.nlm.nih.gov/refseq/release/plant/下载植物的蛋白数据库

第二步: 建库。就两个参数，--in nr输入文件，--db nr 输出的数据库前缀

diamond makedb --in nr --db nr

第三步: 搜索。就两个子命令，blastp和blastx，前者比对蛋白，后者比对DNA序列

diamond blastx --db nr -q reads.fna -o dna_matches_fmt6.txt
diamond blastp --db nr -q reads.faa -o protein_matches_fmt6.txt

-q/--query输入检索序列，--out/-o输出文件，默认以--outfmt 6输出结果和BLAST+的--outfmt 6结果一致。

注意事项:

默认参数主要是针对段短序列，对于比较长的序列，使用--sensitive或--more-senstive提高敏感度。
默认的e-value阈值是0.001, 而BLAST是10，因此会比BLAST结果更加严格

性能优化:

设置比较低的-e参数
设置-k参数，减少输出的联配数目。这会降低临时文件大小和最终结果
--top会输出得分比最好的分数低一定百分比的结果，
--compress 1: 输出结果会以gzip进行压缩

参考文献

Benjamin Buchfink, Chao Xie, and Daniel H. Huson. Fast and sensitive protein alignment
using diamond. Nature methods, 12(1):59–60, Jan 2015.

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