MRM/PRM质谱定量技术

MRM/PRM定量分析是通过选择目标蛋白质的定量代表性肽段，让质谱仅对这些肽段进行质谱信号采集，从而获取目标蛋白质定量信息的质谱技术。利用该技术既可实现样品中靶标物质的相对定量，又可通过合成同位素标准肽段，绘制标准曲线，实现蛋白质的绝对定量。百泰派克公司采用AB SCIEX TripleTOF 5600，AB SCIEX Triple Quad™ 5500，Q Exactive, Fusion质谱平台结合Nano-LC，提供MRM/PRM靶向定量蛋白组分析服务技术服务。

MRM是一项经典的靶向蛋白质组检测技术，也是靶向蛋白组的金标准。MRM首先锁定某蛋白的一个母离子及其一个子离子，后续依赖三重四级杆质谱对离子对（母离子/子离子）进行采集。PRM作为MRM衍生的一种技术，是一种基于高分辨、高精度质谱的靶向定量技术，能够对目标蛋白质/肽段（及含有修饰的肽段）进行选择性检测。

MRM/PRM定量蛋白组学分析实验流程（图片来源：百泰派克生物biotech-pack.com）

PRM技术特点

• 离子全扫描，无需选择离子对，节约实验设计和操作时间；

• 可根据需要选择是否加入合成的标准肽段，节约实验成本；

• 选择性更高，重现性更好，在复杂样品中的抗干扰能力更强；

• 线性检测范围，可达5-6个数量级；

PRM技术应用领域

• 定量蛋白质组学（iTRAQ、label-free、SILAC）后，目标蛋白验证

• 蛋白质和肽（包括修饰）的绝对定量

• 疾病标志物的验证

MRM技术特点

• 灵敏度高，经过两级质谱选择与目标离子一致的离子，排除干扰离子，极大提升信噪比，提高检测目标离子的准确度

• 通量高，一次性可以鉴定多达200多个蛋白

• 可以进行绝对定量分析，无需依赖抗体

• 高精准度鉴定低丰度蛋白，定量范围跨4个数量级

MRM技术应用领域

• 对Label-free等非靶向蛋白组研究结果验证

• 对多个蛋白质/肽段同时进行绝对定量研究

• 研究同源度较高，但缺乏特异识别抗体的蛋白家族变化

• 蛋白翻译后修饰定量研究

• 生物疾病靶标绝对定量研究