使用IGV根据引物确定PCR产物序列位置
2021-11-12 本文已影响0人
玩转ATGC
IGV是一个十分常用且好用的可视化基因组NGS测序信息的软件包,很厉害的一软件,不仅可以windows可视化操作,还可以写代码获取自动截图等,软件官网:http://www.igv.org/
IGV经常用于NGS测序数据的可视化,导入比对生成的Bam文件,即可查看到你想要位置的序列比对信息(后续可以详细介绍一下IGV的使用),示例如下:
![](https://img.haomeiwen.com/i26978844/365dbf4cdf0657ab.png)
回归主题,那么如何使用IGV根据引物序列确定PCR产物序列以及所在基因组的位置呢,当然这个和上一篇文章所用In-Silico PCR工具一样只能手动少量操作,很难处理大量数据,也可用来对其他方式获得的结果进行确认:
这时就要使用到IGV的Tools目录的Find Motif..命令(参考基因组的话根据需要选择即可):
![](https://img.haomeiwen.com/i26978844/6d25558ce38e263d.png)
将你的两个前后两个引物序列分别输入到上图的Search Pattern下的输入框中,然后点击OK即可:
这里还使用上一篇文章中的引物序列:
Gene:HS3ST2
PCR product size:140bp
Primer-1:ATAATTTCCAGAAAG
Primer-2:AGCATGAGAAAGAGGGACA
打开IGV,首先输入基因HS3ST2,并点击GO,就到了该基因所在位置,
![](https://img.haomeiwen.com/i26978844/251a52cd4295c797.png)
然后再使用Tools目录下的Find Motif..命令分别输入前后两个引物序列,引物序列较短,需要不断调节IGV的标尺(右上角+号)达到合适的大小,最后结果如下:
![](https://img.haomeiwen.com/i26978844/b288891590f26f24.png)
验证结果与上一篇文章两个方法完全一致!相当于对上述两个结果进行了验证,哪个方法你感觉方便用哪个就好了!