科研民工生物化学技术知识(BioEngX)生命科学-简书专题

DNA聚合酶你知多少?

2019-07-29  本文已影响50人  ss的专属赫兹

DNA polymerase Ⅰ

5’→3’的DNA聚合酶活性

5’→3’的核酸外切酶活性

3’→5’的核酸外切酶活性

klenow fragment:是DNA polⅠ的一个片段,有5’ - 3’聚合活性, 3’ - 5’外切活性,

无5’- 3’外切活性

T4 DNA polymerase:

 5‘-3’聚合活性

 3‘-5’外切活性

T7 DNA polymerase:

 聚合活性,合成能力最强

 3’-5’外切活性

所谓测序酶即是修饰了的T7 DNA聚合酶,是采用缺失的方法,从外切核酸酶结构域中除去28个氨基酸,这样使T7 DNA聚合酶完全失去了3'-5'的外切核酸酶活性,只有5'-3'聚合酶的活性,而且聚合能力提高了3~9倍,测序时常用此酶。

Taq DNA polymerase:实验室最常用~

 1976, Thermus aquaticus,在美国黄石国家公园温泉中分离, 聚合活性依赖Mg2+

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