limma快速差异分析工具!
2020-06-28 本文已影响0人
生信学霸
01—研究背景
今天给大家介绍的是用 R程序包limma[1]差异分析 limma包是2015年发表在Nucleic Acids Resarch一个做差异分析的工具,目前引用次数高达七千多次。Limma包是基于voom的算法,它既可以对芯片数据进行差异分析,也可以对转录组高通量测序数据进行差异分析。
02—操作方法
1.打开网址:http://sangerbox.com/Tool点击“limma快速差异分析工具”即可进入分析界面2.输入数据格式表达矩阵:行名为Gene Symbol,列名为样本名称,如下图所示
![](https://img.haomeiwen.com/i14116884/14521e1e45f55248.png)
分组矩阵:共两列,第一列为样本名称,要与表达矩阵的样本名一一对应,第二列为样本的分组信息(limma包通常适用于两组样本之间做差异分析),如normal与tumour如下图所示:
![](https://img.haomeiwen.com/i14116884/1d860a017a5a558a.png)
3.参数设置
![](https://img.haomeiwen.com/i14116884/91bab958fc4c4c6e.png)
4.结果目录:在个人中心有结果目录,如果事先不指定运行结果目录,默认输入到limma_DEG目录下,结果如下图所示:
![](https://img.haomeiwen.com/i14116884/63566339e8da368b.png)
结果文件中包含差异基因火山图和差异基因热图,如下图所示。
![](https://img.haomeiwen.com/i14116884/b6574207e4a630ad.png)
参考文献
[1] Ritchie ME, Phipson B, Wu D, et al. limma powers differential expression analyses for RNA-sequencing and microarray studies. Nucleic Acids Res. 2015;43(7).