circRNA测序及机制全面讨论
纪伟讲测序,每周一讲,讨论组学,包括基因组,转录组,蛋白组,代谢组等相关实验数据分析及分子机制挖掘思路。针对circRNA测序,我们讨论了如何通过circRNA测序找到合适的circRNA分子,也探讨了3种经典的circRNA机制思路,及一种新型的circRNA机制,在此汇总,方便研究circRNA的老师查阅。
第一讲:可信度高circRNA应该是什么样的
主要讨论:
1)做circRNA测序为什么用rRNA去除的方式,而不是RnaseR 去线性。
2)RNAseq鉴定circRNA可靠性比较差,可以通过多软件取交集减少错误。
3)差异比较好的circRNA是什么样的,p值不是最重要的。
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可信度高circRNA应该是什么样的
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第二讲:circRNA ceRNA机制研究思路
主要讨论:
1)ceRNA机制中circRNA分子如何选择;
2)ceRNA机制作用的两个条件,细胞定位,Ago2结合;
3)如何锁定下游的miRNA和靶基因;
4)验证结合位点的几种方法;
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ceRNA机制探讨
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第三讲:circRNA结合蛋白机制总结
主要讨论:
1)circRNA挑选标准,需参考来源基因的功能;
2)circRNA找结合蛋白方法,并预测验证;
3)circScan软件预测circRNA与蛋白的结合位点;
4)circ结合蛋白结合DNA/RNA/蛋白等各种分子设想;
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circRNA新机制-circRNA结合DNA思路解析
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第四讲:circRNA翻译多肽/蛋白机制思路
主要讨论:
1)预测circRNA翻译多肽的几种方法;
2)如何验证circRNA通过编码蛋白发挥功能;
3)如何检测circRNA翻译的多肽;
4)如何关联通路和机制;
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circRNA新机制-circRNA结合DNA思路解析
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第五讲:circRNA与来源基因DNA互补结合思路
主要讨论:
1)circRNA结合DNA阻碍转录过程思路;
2)是否能通过生信方法预测circRNA结合DNA作用的靶基因;
3)怎么捕获circRNA结合的DNA,预测circRNA二级结构;
4)如何做后续机制探讨;
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circRNA新机制-circRNA结合DNA思路解析