2021-07-14 Prime editor——还有什么办不到

        基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术可以很方便的进行基因敲除，当然也可以进行基因突变，只是这种突变效率偏低。而随后发展的Base editor，即单碱基编辑器则可以实现A-C，G-T的碱基转换，听起来很完美，但鉴于Base editor的编辑窗口并不是单碱基的，因此有时候会产生非期望的编辑结果。而Prime editor则带来了新的解决方案——巧妙将Cas9 （Nickase）与逆转录酶进行融合，同时在sgRNA上引入一段用于进行修复的RNA模板，在Cas9（Nickase）将双链DNA中的一条链切开后，以其中的一条断裂DNA为引物，sgRNA的修复RNA为模板，进行逆转录，将修复模板中的突变，插入亦或删除信息引入新合成的DNA中，在细胞的DNA修复作用下，将编辑后的DNA融合进基因组DNA，达到定点编辑的目标。

Reference

Anzalone, A. V. et al. Search-and-replace genome editing without double-strand breaks or donor DNA. Nature 576, 149-157 (2019).