2021-07-26-NCBI设计引物
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总结
1、PCR 产物大小：70-200bp 理想150bp
2、引物长度：18-22bp 理想20bp
3、Tm--解链温度：59-65 理想62
解链温度是指一般的引物变成单链
预计的退火温度小2-5度左右，对于62度Tm 退火温度预计为58-60
4、GC含量：GC越高，Tm越高 50-60%之间为宜；至少一个G或C剪辑在最后五个剪辑内
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5、避免重复序列
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6、至少被一个内含子分开，能够限制DNA扩增的机会
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7、特异性结合到所需的DNA上
