老鼠粪便采样方法

2019-07-07  本文已影响0人  JarySun

在科研中,小白鼠是实验中常用的模式动物,研究它的粪便时该如何收集样本?

一、小鼠粪便采样总体原则

1)采集容器应干净无菌;

2)采集器具应使用一次性无菌用品;

3)可以采用应激排便收集粪便;

4)采集的粪便应收集于带盖无菌离心管内;

5)收集的样本应立即-80℃保存(收集的样本可置于干冰上转移至-80℃),干冰运输;

6)粪便样本采集在一天的同一时段进行(最好是早晨),避免微生物组成在同一天不同时间内发生变化。

方法一:代谢笼收集粪便(资料来源:BIOVANO CHINA)

代谢笼:粪尿分离装置。用于收集实验动物自然排出的尿液,是一种特殊设计的为采集实验动物各种排泄物质的密封式饲养笼。除了尿液外,通过特殊设计可以收集粪便、采集呼出的二氧化碳。

代谢笼示意图

a)代谢笼粪尿分离原理

   ——粪尿分离漏斗

粪尿分离漏斗示意图

b)适用领域

    1)生物化学

    2)生理学

    3)营养学

    4)药代动力学

    5)毒理学

c)收集效果图

收集效果示意图

d)使用代谢笼的优势

1)所有关键部件均为疏水性聚甲基戊烯(PMP)材料,确保完全分离,不挂壁;  

2)可长时间收集(24~48小时)独特的漏斗和锥形体设计,可以将粪便和尿液分离收集到笼外的收集管中,不会互相污染,因此分离是直接和完全的。集尿管有防蒸发设计,单个小鼠也可以收集。

e)使用代谢笼的劣势

1)采集装置成本过高;

2)仅为采集粪便,大材小用;

3)适用于同时有其他领域(毒理学、生化、营养、生理)研究需求的人使用。

方法二、应激性排便

采集步骤:

1)固定小鼠,将其尾部提起; 

2)用手指轻轻按压小鼠下腹部;

3)收集新鲜粪便于对应编号的若干无菌EP管中; 

4)每管分装2-3颗;

5)-80℃保存,干冰运输。

方法三、自然排便

准备材料:

1)无菌牙签或镊子;

2)高压灭菌后的微隔离器空笼子或无菌干净的小鼠笼子;

3)1.5mL无菌EP管。

采集步骤:

1)贴标签并标记(针对每一只大鼠&小鼠);

   样本ID;处理组别;其他需要关联该样本的信息

2)将个体小鼠放置于高压灭菌或无菌的小鼠笼子中(无需垫料);

3)允许大鼠和小鼠自然排便,用牙签或无菌镊子收集排出粪便于1.5mL无菌EP管中,小心闭合管盖,更换牙签或镊子进行下一次采样,直至所有老鼠粪便收集完成;

4)带有粪便的管子立即至于-80℃ 保存,并可长期保存;

5)需要长途运输样本,采用足够的干冰进行运输,确保样本始终处于冷冻状态。

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