circUBE3C通过与miR-191结合并上调p27的表达来调
2025-05-14 本文已影响0人
实验小助手
标题:circUBE3C modulates myoblast development by binding to miR-191 andupregulating the expression of p27
circUBE3C通过与miR-191结合并上调p27的表达来调节成肌细胞的发育
非编码RNA,包括miRNA(microRNAs)和circRNAs(环状RNA),是肌肉发育过程中成肌细胞增殖和分化的关键调节因子。然而,对环状RNA在肌肉发育中的具体作用和分子机制仍知之甚少。基于现有的circRNA-miRNA mRNA网络,我们的研究重点是circUBE3C,探索其在牛胎儿和成年肌肉组织中的差异表达,并研究其对成肌细胞增殖、凋亡和分化的影响。通过采用一系列先进的检测方法,包括CCK-8(细胞计数试剂盒-8)、EdU(5-乙炔基-20-脱氧尿苷)、流式细胞术、蛋白质印迹分析和RT-qPCR,全面评估了针对circUBE3C的过表达质粒和siRNA(小干扰RNA)的功能分析。体内研究表明,circUBE3C的过表达阻碍了骨骼肌再生过程。从机制上讲,我们证明了circUBE3C与miR-191相互作用,并通过细胞质分离、生物信息学预测、双荧光素酶报告分析和RIP(RNA免疫沉淀)减轻了p27的抑制。我们的研究结果表明,新型circRNA circUBE3C与miR-191竞争性结合,从而抑制牛原代成肌细胞的增殖并促进其凋亡,揭示了牛骨骼肌发育的调控途径。这些发现扩展了我们对哺乳动物中环状RNA功能的理解,并为进一步探索其在肌生成和肌肉疾病中的作用提供了基础。
其中circUBE3C的过表达质粒的转染是通过EntransterTM-in vivo DNA来实现。