4️⃣ 核酸序列特征分析(1):开放阅读框识别
2019-01-25 本文已影响99人
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序列比对和序列特征分析总目录
阅读框Open Reading Frame,ORF
ORF指的是DNA上的序列,从5'端翻译起始密码子ATG到终止密码子(TAA,TAG,TGA)的蛋白质编码序列。
对于任意给定的一段DNA,有两个问题需要考虑,
- 一是DNA双链中的哪条是编码链
- 二是编码区究竟从第一个碱基开始进行编码
所以每条链都有潜在的3种ORF,而对于双链DNA来说就有6种可能的ORF。也就是说先从给定的DNA单链为模版,分别从5'-3'方向第123个碱基开始翻译,再以互补链为模版,分别从3'-5'方向的第123个碱基开始翻译,得到另外3种翻译结果。正链上的正向读码框forward,负链的为反向读码框reverse。6个潜在ORF中,一般选择中间没有被终止密码子隔开的最大的读码框为正确的结果。这篇文章对此进行了详细介绍
关于真核和原核的ORF
原核生物基因绝大多数是连续基因,不含内含子。而真核生物基因结构一般为断裂基因,编码区被内含子隔开,又有不同的拼接方式,所以真核生物的ORF长度变化范围比较大,预测就有比原核有难度。但是,真核的ORF中,外显子和内含子之间的连接有GU-AG规律。也就是内含子序列5'端起始的两个核苷酸总是GU,3'端最后两个核苷酸总是AG,即5'-GU......AG3,这可协助识别ORF
ORF预测的工具很多,一般基于以下两种算法,
第一,基于统计学分析和模式分析,从序列本身进行预测,不需要与已有数据库比较,所以速度快,如果缺少待分析物种的数据库信息,这种方法比较好,比如GENSCAN
第二,以同源比对为基础,依赖于已有数据库,预测的正确性比1高。
广泛应用的ORF Finder和GENSCAN分别介绍,网址
1输入fasta格式序列
image.png2 参数选择
image.png默认1 standard,根据需要选择
3结果如下
image.png还可以BLAST进行比对。genscan