LIBRA-seq：快速开发单克隆抗体的单细胞技术

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单细胞测序方法和原理系列：

• 1. 单细胞转录组建库原理：SMART、TargetAmp和10X genomics
• 2. DNA文库构建和Illumina测序化学原理
• 3. 单细胞免疫组库：TCR基因重排原理和TCR测序建库方法
• 4. 单细胞ATAC-seq原理介绍与报告解读
• 5. CITE-seq：同时测细胞表面蛋白和RNA的单细胞测序

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1. 文章

LIBRA-seqs全称Linking B cell Receptor to Antigen specificity through sequencing，意思是通过测序将B细胞受体与抗体特异性连接。
这项技术的方法学的文章在2017年发表在cell上。

特点：

2. 方法原理

• 2.1 对抗原加标签
  在抗原上连接上PE燃料，用于流式分选，连接上特定DNA条码，用于测序。（这里的抗原就像鱼饵，每种鱼饵可以抓特定的鱼。给鱼饵加上标签，就可以知道抓到的是什么鱼）

• 2.2 把外周血单核细胞与抗原孵育

• 2.3 流式细胞仪分离带荧光的细胞

• 2.4 通过10x仪器，把细胞分离再测序

• 2.5 经过基因重组表达，得到目标抗体

3. LIBRA-seq优点

传统方法：杂交瘤技术和噬菌体展示技术
和传统方法相比，LIBRA-seq具有如下优点：

• 1. 速度快

• 2. 可用于被感染过的，有免疫力的人的外周血

• 3. 一次性得到目标抗原、抗体 轻重链的全场序列

• 4. 可以一次实验筛选多个抗原

• 5. LIBRA-seq得分直接显示了抗体的结合特异性

3. 小结