根癌农杆菌介导转化的原理（Agrobacterium tumef
2020-03-23 本文已影响0人
Han_zh
19世纪末Smith首次发现根癌农杆菌 (A. tumefaciens)，它是一种革兰氏阴性土壤杆菌，其上含有 Ti 质粒，质粒上有一段 T-DNA。当双子叶植物的细胞受伤时会释放大量酚类化合物，在酚类物质的诱导下，农杆菌会吸附在植物受伤处，T-DNA 片段这时就会转移并整合到受体物的基因组中。农杆菌的成功转化需要 Ti 质粒上的 T-DNA 及 Vir 区，它们都是不可或缺的。在T-DNA 区左右两端是两个 25 bp 的正向重复序列，分别为左边界LB和右边界RB。Vir 区的基因能激活 T-DNA 的，转移。在自然条件下，根癌农杆菌只感染双子叶植物，但经过人工诱导（培养中添加乙酰丁香酮 AS），农杆菌也可介导单子叶植物，真菌等。T-DNA 转移整合进受体基因组中有两种方式，一种是同源重组，利用片段间的同源性定向置换掉目的基因，是进行基因功能研究的重要方法。而另一种方式是异常重组，即 T-DNA 的整合插入是随机无规则的。
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