磁珠法DNA pull down试剂盒、蛋白质-核酸相互作用

2022-08-26  本文已影响0人  如期分享

技术服务描述

针对目标区域设计特异性DNA探针并经过脱硫生物素标记,脱硫生物素探针可以和偶联在磁珠上的链霉亲和素亲和结合。然后,细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,再经过Western Blot或质谱(MS)鉴定蛋白质类型。

服务流程

1. 根据研究目的决定研究方案

2. DNA序列T克隆

3. DNA生物素探针合成(标记方法:Biotin-14-CTP)

Biotin-14-CTP is a CTP analog with biotin attached at the N 4 -position of the pyrimidine base by a 14-atom linker. Biotin-14-CTP can be efficiently incorporated into RNA transcripts using T7, SP6, or T3 RNA polymerase and the appropriate template in the presence of ATP, GTP, UTP, and Biotin-14-CTP (1). The biotinylated RNA can be used as a probe in membrane-based or in situ hybridizations (2). The amount of material provided is sufficient for up to 20 transcription reactions (1 µg template).

4. DNA pull-down实验

5. Western Blot检验(若需质谱分析请另外咨询)

6. 数据分析及Figure制作

客户提供

1. 目的基因、目的蛋白信息

2. 需检测的细胞样品

如期提供

1. 原始数据、结果图片

2. 标准实验报告

3. SCI标准Result Figure

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