【ProteoWizard MSConvert】质谱文件格式简介

质谱格式

质谱文件格式多种多样，各仪器厂商产出的数据都有不同。虽然HUPO已经对质谱数据进行了标准化，但大家依然是我行我素，因为不得不用它们提供的软件，而不同的软件会要求不同的格式进行搜库（不过现在很多软件以及支持多种数据格式了，如MaxQuant）。各厂商对应的文件格式如下表：

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好在ProteoWizard为我们提供了格式转换的工具MSConvert，它可以转换为以下数据格式：

• mzML 1.1
• mzML 1.0
• mzXML
• MGF
• MS2/CMS2/BMS2
• mzIdentML
  其中mzXML和mzML就是标准数据格式。

格式转换

MSConvert的Linux版本并不友好，需要wine/docker来运行Proteowizard，但一般linux默认都是x64架构，而x64一直诟病于对Framework的支持。

1.Linux转换

Wine

msconvert –help
msconvert data.RAW –mzXML #默认mzML
msconvert *.RAW -o my_output_dir
msconvert data.RAW –zlib –filter “peakPicking true [1,2]” #用vendor方法对msLevels 1/2进行中心化过滤，并用zlib对结果数据进行压缩，此命令比较常用

更多命令可参考：msconvert

Docker
ProteoWizard提供了docker解决方案

# 下载docker镜像
docker pull chambm/pwiz-skyline-i-agree-to-the-vendor-licenses

##直接运行
docker run -it --rm -e WINEDEBUG=-all -v /home/xxx/rawfiles/:/data chambm/pwiz-skyline-i-agree-to-the-vendor-licenses wine msconvert /data/*.raw --filter "peakPicking true 1-"

## 交互式运行，通过bash进入
docker run -it --rm -e WINEDEBUG=-all -v /home/xxx/rawfiles/:/data chambm/pwiz-skyline-i-agree-to-the-vendor-licenses /bin/bash

转换过程会遇到一些错误，好像都有一些问题。

2.Windows转换

GUI界面版本操作起来更简单，但数据转移和运行速度实在是忍不了。

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使用默认参数不过滤的话，转换的文件会非常大（比源文件增加数倍，因为它把一些无强度的峰也加进去了），速度也巨慢。一般Filters需要设置为Peak Picking，MS Levels设为1-2。

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而且要注意，选择后记得按Add，否则还是没有加入peakPicking，并且要将peakPicking放在第一行（行可拖动）。
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其他格式转换软件

• ThermoRawFileParser
• Proteome Discoverer
• GNPS
  不同软件转换的结果很可能不同。比如同一个数据，我用ThermoRawFileParser（默认参数），同事用Proteome Discoverer，得到MGF的谱图数竟然有4-5倍差异！后来用MSConvert转换和ThermoRawFileParser谱图一致，它俩的算法好像是一样的。哎，搞不懂，如果连原始数据质量都不能保证，还做个屁的数据分析。

Ref：
Employing ProteoWizard to Convert Raw Mass Spectrometry Data
msconvert使用介绍
在Linux环境运行msconvert转换格式
Use msconvert in Linux or Mac