石蜡切片的操作要点

组织化学中的组织切片主要有石蜡切片法、冰冻切片法和振动切片法等。

石蜡切片法比较节省时间，操作容易，可切极薄的组织片(4 μm 以下，通常为6~10μm 厚的切片），能做连续切片，且组织块可包埋在石蜡中永久保存。但石蜡切片只能用于较小的组织块，不适用于大的组织块。石蜡切片法能改变组织内的化学反应，甚至使可显示的酶和其他物质（如脂类）完全丢失，或使蛋白质变性、酶失活等。因此，在有条件时可采用冰冻干燥法或冰冻替代法，使组织块在低温下脱水干燥，以保存其化学成分或酶活性。

石蜡切片的操作要点如下：

(1) 切片刀或一次性切片刀片必须锋利无凹痕。

(2) 载玻片必须清洗洁净。

(3) 将切片刀或刀片安装在持刀座上（以15°为宜），不切片时应将刀锁紧，以免受伤。

(4) 将蜡块固定于支持器上，并调整蜡块和刀刃至适当位置（刀刃与蜡块表面呈5 °夹角）。

(5) 细心移动刀座或蜡块支持器，使蜡块与刀刃接触，旋紧刀座和蜡块支持器。

(6) 用右手匀速旋转切片机轮，修切蜡块表面至包埋其中的组织块完整

暴露。

(7) 调节切片厚度调节器（一般为4~6μm) ，切出的蜡片应连续成带，完

整无缺，厚度均匀，无刀痕、颤痕、皱折、开裂、缺损、松解等。

(8) 以专用小摄子轻轻夹取蜡片，放入伸展器的温水中( 45°C 左右） ，使切片全面展开。注意水温必须适宜，水面必须洁净。

(9) 将蜡片附贴千涂有蛋白甘油或经3－氨丙基－三乙氧基硅烧(3-aminopropyltriethoxy silane, APES) 等贴片剂处理过的载玻片上，蜡片与载玻片之间应无气泡。

(10) 将贴附了蜡片的载玻片置千烤箱中烘烤(60~62°C, 30~60 min) ，然

后即可进行染色。