载体线性化的验证

Q1：怎样判断载体是否完全线性化？
Q2：怎样根据电泳图确定载体线性化酶切是否完全？

A：点胶检测的时候可以点一个原始质粒。质粒是环状超螺旋结构，跑胶的时候会快一些，所以会比整个片段稍低，酶切的话会切掉一部分片段，线性化之后会比质粒跑的慢。所以会出现两种情况，一种是酶切后的线性化片段刚好和质粒跑在了一个位置，一种是质粒位置稍低。但一般是后一种情况，也就是线性化载体比质粒位置高。