第十章—培养基的制备方法总结

2020-07-05 本文已影响0人 DREAM_e6b7

现在来总结一下第十章的内容

这一章主要讲了培养基的制备方法，从几个方面来讲？首先是培养基的成分有哪些，培养基的分类，注意事项，最后培养基的制备，这最后一节我们没有学习，因为主要是实操内容文字不好编辑

先一个个来看看，第一节讲的是培养基的成分，都有哪些呢，让我们一起来回顾一下。蛋白质，糖，维生素，无机盐和水，这是细菌体内的营养物质组成，所以培养基对应的营养物质是：蛋白胨，多糖，单糖或双糖，生长因子，金属离子和水

蛋白胨容易吸潮，所以保存时避光干燥处存放

大部分的细菌可以直接利用葡萄糖产生热量，所以可在培养基中加入葡萄糖，但是糖不耐高温，成分可以分开灭菌

维生素就是细菌的生长因子，一般是B族维生素，它是构成细菌体内辅酶的结构，酶可以催化体内的生化反应，达到促进体内新陈代谢的目的，使细菌快速生长

无机盐则是一些金属离子，可以调节细菌体内的渗透压

水在细菌体内是必不可少的东西，参与了体内多种物质反应，所以培养基中需要加入水，它可以利用水来溶解培养基中的营养物质

这些成分都添加进去了，当然还少不了凝固剂了，那就是琼脂，如果怕有其它细菌污染，在制备时可以加入抑菌剂，根据自己自己的目的不同，还可以在培养基中加入指示剂，观察细菌的生长情况

培养基的成分我们大概介绍完了，接下来是培养基的分类了，根据物理状态分可以分成三类：固体，半固体，液体；根据用途分可以分成增菌培养基，基础培养基，鉴别和选择培养基

现在我们一个个来介绍：固体培养基主要是琼脂类培养基，可以分为平板和斜面培养基，平板主要是用来分离纯化，计数，观察菌落形态；斜面主要是用来菌种传代，保存功能

半固体培养基是用来观察细菌的运动以及一些生化反应特征

液体培养基主要是用来细菌增殖的作用，因为细菌在液体中与培养基的接触面积最大，增殖分化速度最快

按照用途分可以分为基础，增殖，选择和鉴别培养基三类

基础培养基是大部分的细菌都可以在上面生长

增殖培养基一般是液体培养基，专一性比较强，每种液体培养基中只能用来增殖特定的菌种

选择和鉴别培养基：这种特殊的培养基只能适合某些菌落生长，所以可以用来鉴别菌种

第三节我们讲的是培养基在配制过程中需要的注意事项

首先是容器的选择，选择一个干净干燥后的玻璃器皿，不能选择金属材料的器皿，因为金属可以和培养基中的成分发生反应

然后是培养基的灭菌，根据里面的成分不同安排不同的灭菌方法，如果里面有单糖类物质要分开灭菌，一般情况下用的都是高压蒸汽灭菌锅121摄氏度15～30min，有些不耐高温的物质可以用100摄氏度间歇式的流通蒸汽灭菌，分成三天灭菌可以达到杀灭所有细菌繁殖体和芽孢的作用

灭菌完等冷却至室温后需要用无菌操作取出一小块的培养基测试pH，除另有规定外，pH一般在规定下的正负0.2

培养基需要保存在2～25摄氏度的冰箱里

好了现在可以介绍一下实验室常用的培养基—干粉培养基，它是进过脱水处理后的培养基，特点是方便易携带

干粉培养基的脱水方法有四种，分别是真空干燥法，喷雾法，烘干法，球磨法

真空干燥法：让物料在一个真空的环境中被加热，由于是真空，所以很容易达到水分的沸点，水变成蒸汽挥发，被收集后排出，为什么在真空的环境下水的沸点会降低呢？因为它只需要很少的热量就能让体内的原子分开变成气体，当在氧气充足的环境下，水的沸点至少要达到100摄氏度

喷雾干燥法：把物料喷成细小的水珠，当水珠进入干燥室和热空气相遇会在很短的时间内变成水蒸气挥发，水珠里的物料则因为脱水变成粉末掉落被收集

烘干法：各组分配制好放在烘箱中烘干水分

球磨法：各组分先分别干燥后加入球磨机中充分研磨混合后分装