NGS避坑指南RNA-seq

RPKM/FPKM/TPM/CPM说明

2019-05-16  本文已影响23人  装在瓶子里的阳光_2a70
RPKM (Reads Per Kilobase Million) #唯一的区别是FPKM适用于双端测序文库
FPKM (Fragments Per Kilobase Million)  #而RPKM适用于单端测序文库
TPM (Transcripts Per Million)
RPM/CPM (Reads/Counts of exon model per Million mapped reads)
 #公式:RPM=total exon reads / mapped reads (Millions)

结论
1.学术界已经不再推荐RPKM、FPKM

2.比较基因的表达丰度,例如哪个基因在哪个组织里高表达,用TPM做均一化处理

不同组间比较,找差异基因,先得到read counts,然后用DESeq2
或edgeR,做均一化和差异基因筛选;如果对比某个基因的KO组
和对照,推荐DESeq2。

3.DESeq2和edgeR不用RPKM/FPKM或TPM做均一化,而是直接用原始的read counts做均一化处理

4. RPKM/FPKM与TPM的计算

image.png

参考:1.http://blog.sciencenet.cn/blog-3372875-1089851.html
2.https://www.jianshu.com/p/03ff90be075c
3.http://blog.sciencenet.cn/blog-1113671-1038659.html

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